华支睾吸虫蛋白酶体α2新基因的生物信息学分析与克隆表达

摘要：

目的 发现华支睾吸虫成虫蛋白酶体新基因,应用生物信息学方法预测其结构和功能,表达重组蛋白为进一步确定其功能特征奠定基础.方法 通过华支睾吸虫成虫cDNA文库的大规模测序,获取全长cDNA序列,利用生物信息学软件ORF finder,BLAST,Conserved Domains 和ExPASy等识别华支睾吸虫蛋白酶体α2(CsPSMA2)新基因,分析其基因和编码蛋白结构,同源性比对并构建系统发育树.将CsPSMA2基因克隆到pGEX-4T-1原核表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达产物经 SDS-PAGE鉴定.结果 确定了编码CsPSMA2的新基因并成功登录到GenBank (Accession NO.:EU223819).该基因全长833bp,编码235个氨基酸,第5-232aa之间含有蛋白酶体α2全长结构域,理论分子量为26.0kDa,分子进化分析显示 CsPSMA2的蛋白与日本血吸虫亲缘关系最近,重组质粒融合表达了带有GST标签的CsPSMA2蛋白.结论 发现了华支睾吸虫蛋白酶体α2新基因,确定了其重要的功能域和结构特征,成功进行了该基因在大肠杆菌中的克隆表达.

关键词：华支睾吸虫、蛋白酶体α2、生物信息学、克隆、表达

所属期刊栏目：25

分类号：R383.2(医学寄生虫学)

资助基金：广东省自然科学基金团队项目资助

在线出版日期：2009-11-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：865-869