鼠疫耶尔森杆菌YPO0388蛋白的原核表达与鉴定

摘要：

目的 构建表达鼠疫耶尔森杆菌(Yersinia Pestis)的假想蛋白YPO0388的重组质粒,为鼠疫耶尔森杆菌的诊断方法 的发展提供支持.方法 用PCR方法 扩增出ypo0388基因,将其克隆到表达载体pET32a(+)中转化到大肠杆菌(E.coliBL21(DE3)),用IPTG诱导目的 基因表达,用SDS-PAGE方法 对表达产物进行分析,用Western Blot鉴定其免疫原性,并纯化出目的 蛋白.结果 根据单、双酶切鉴定和DNA测序结果 显示,目的 基因ypo0388已成功连接到表达载体pET32a(+)上,SDS-PAGE结果 显示表达产物rYPO0388相对分子质量约为69.71kDa.重组蛋白经Western blot鉴定,能被兔抗鼠疫菌EV株血清识别.结论 成功克隆并构建了pET32a-ypo0388重组基因原核表达系统,所表达的重组蛋白rYPO0388具有较好的可溶性与抗原性,有可能做为研制新型鼠疫耶尔森杆菌诊断试剂的备选抗原.

关键词：鼠疫耶尔森杆菌、抗原、克隆、表达

所属期刊栏目：25

分类号：R378(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家"十一五" 863 计划生物和医药技术领域2006年专题目标导向课题项目2006AA02Z4A7

在线出版日期：2009-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：722-724