10.3969/j.issn.1002-2694.2009.07.013
1株汉坦病毒的分离及其S基因片段的克隆和序列分析
目的 对浙江省肾综合征出血热(Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome,HFRS)疫区-龙泉,新分离到的毒株的S基因片段进行克隆并进行序列测定及分析,以确定毒株的型别和基因变异程度,为进一步研究病毒进化和变异提供了有利条件.方法 采用直接免疫荧光检测疫区鼠肺HV抗原.将HV抗原阳性的鼠肺标本接种Vero-E6细胞,分离病毒.参考GenBank 发表的汉坦病毒核蛋白基因序列,设计合成一对引物,提取分离株细胞培养物的总RNA,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增新毒株S片段基因,并克隆入载体,纯化后进行核苷酸序列测定及分析.结果 成功分离到的新毒株S片段的全基因序列共 1 700个核苷酸,只有一个开放读码框架,共编码 429 个氨基酸.新毒株与HTN型毒株比较,核苷酸同源率为85.7%~91.9%.与SEO型 毒株比较,核苷酸同源率为71.2%~75%,表明该毒株为HTN型毒株.结论 浙江HFRS疫区新分离汉坦病毒株可以定型为HTN型毒株,可能为新的亚型.
汉坦病毒、病毒分离、S片段、序列分析
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R373(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2009-08-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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