10.3969/j.issn.1002-2694.2009.04.004
幽门螺杆菌尿素通道蛋白基因UreI的真核载体构建、表达及抗原性研究
目的 构建含人幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)尿素通道蛋白编码基因(UreI)的真核表达的重组载体,并在COS-7细胞中表达,为核酸疫苗的开发奠定基础.方法 以原核表达质粒pET32a(+)/UreI为模板,扩增UreI编码基因片段,将目的 基因与同样进行酶切、纯化的载体pEGFP-N1进行连接,而后转化并筛选含有目的 基因的重组载体pEGFP-N1/UreI,并在COS-7细胞中表达,以荧光蛋白和Western blot法检测其表达产物.结果 经酶切、测序证实插入的基因片段为H.pylori UreI蛋白编码基因;荧光显微镜下和Western blot法等检测显示,该重组质粒能够在COS-7细胞中表达目的 蛋白,同时能够被H.pylori阳性患者血清所识别.结论 成功地构建了真核重组载体pEGFP-N1/ UreI,并在COS-7细胞中表达.
幽门螺杆菌、尿素通道蛋白蛋白、核酸疫苗、真核表达载体
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R378.2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金30371318;渝科发[2002]18-86;渝教科[2002]18-6联合资助
2009-05-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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