卡氏肺孢子菌55kDa抗原的原核表达与纯化

摘要：

目的 体外扩增卡氏肺孢子菌(Pneumocystis carinii,Pc)55kDa抗原(p55)570bp的基因片段,构建原核表达载体pGEX-570,诱导表达并纯化重组蛋白.方法 以卡氏肺孢子菌DNA为模板,扩增其基因片段,连接至pGEM-T载体,随后构建pGEX-570重组表达质粒, 经双酶切、PCR及测序鉴定后将其转化入BL21大肠杆菌中,经IPTG诱导表达融合蛋白.采用透析袋电泳法纯化融合蛋白.结果 重组表达质粒pGEX-570经酶切,PCR鉴定及测序结果表明构建成功.IPTG诱导表达融合蛋白GST-p55/570,分子量约为47kDa.用透析袋电泳法纯化重组蛋白,经SDS-PAGE确认正确.结论 本研究成功构建了pGEX-570原核表达载体,诱导表达并纯化GST-p55/570融合蛋白.为进一步开展肺孢子菌55kDa抗原的研究奠定了基础.

关键词：卡氏肺孢子菌、p55抗原、基因克隆、蛋白纯化

所属期刊栏目：25

分类号：R382.9(医学寄生虫学)

在线出版日期：2009-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：249-252