贝氏隐孢子虫PCR检测试剂盒的研制

摘要：

目的 研制禽类贝氏隐孢子虫的PCR检测试剂盒.方法 根据贝氏隐孢子虫18S rRNA和ITS-1序列,选取遗传标记位点最多的一段核苷酸序列作为特异PCR引物的靶序列,设计、合成了一对针对贝氏隐孢子虫的特异性引物 (YJWF:5'-ACTGATATACAATACCACGG-3'和YR:5'-GCGGATAAAGTTCAGGTTC-3'),对PCR反应条件进行了一系列优化,并分别对试剂盒的特异性、敏感性、稳定性、重复性和保存期等进行了系列研究.结果 该试剂盒能特异性地扩增出贝氏隐孢子虫基因组中相应片段,与安氏隐孢子虫,微小隐孢子虫,柔嫩艾美尔球虫等相关原虫基因组DNA无交叉反应;最低能检测到3.48个卵囊;反复冻融50次对试剂盒没有影响;室温条件下至少可保存4个月.结论 该试剂盒的各项指标达到了贝氏隐孢子虫的检测要求.

关键词：贝氏隐孢子虫、18SrRNA、ITS-1、PCR、试剂盒

所属期刊栏目：25

分类号：R832.3(航海医学)

资助基金：广东省科技计划项目2006B20801006

在线出版日期：2009-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：241-244