金黄色葡萄球菌α-溶血素基因表达及溶血活性检测

摘要：

目的 为了进一步研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)α-溶血素(Hla)的分子致病机理及其抗原性,对S. aureus Hla进行了表达纯化.方法 用聚合酶链式反应(PCR)技术,从S. aureus wood46株中扩增出hla 基因,将该基因经BamHI和SalI双酶切后克隆到表达载体PET-32a中,获得重组质粒pET-32a(+)/hla,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Western blot检测分析,然后进行纯化和用溶血试验检测其活性.结果 扩增的hla基因序列与已发表的hla基因序列同源性为100%,构建的重组表达质粒pET-32a(+)/hla在E. coli BL21(DE3)中得到表达,重组α-溶血素蛋白为53kDa,纯化后的溶血活性为5000HU.结论 成功表达并获得了有活性的重组Hla蛋白.

关键词：金黄色葡萄球菌、α-溶血素、基因表达、溶血活性

所属期刊栏目：25

分类号：R378.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：龙江省科技攻关重大项目GA02B501

在线出版日期：2009-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：229-233