SS2人源分离株ZYH24 EF的表达纯化及其单克隆抗体的制备

摘要：

目的 建立猪链球菌2型(SS2)胞外因子(EF)的免疫学检测方法.方法 将SS2 四川人源分离株ZYH24 EF抗原性强的区域进行克隆、原核表达,对表达的融合蛋白(rEF-GST)采用亲和层析法纯化、经凝血酶作用去除标签蛋白获得纯化的EF目的 蛋白.以纯化的EF免疫BALB/c小鼠,间接ELISA方法筛选阳性克隆,对获得的抗EF单克隆抗体(McAAbs)进行譬异性分析,并建立猪链球菌EF检测方法.结果 得到rEF-GST和EF相对分子量分别为62 000和35 000;建立了4株稳定分泌抗EF McAbs的杂交瘤细胞系2G1、5H7、3H4和1F2;腹水的特异性鉴定结果表明4株McAbs能特异性的识别EF;以2G1单抗腹水和抗EF多克隆抗血清建立的夹心ELISA可特异地检测EF.结论 4株抗EF McAbs的制备对猪链球菌检测试剂盒的研制以及该病的防治有重要意义.

关键词：猪链球菌2型、胞外因子、表达、单克隆抗体

所属期刊栏目：25

分类号：S852.61:Q78(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家"十五"科技攻关2003BA712A03-05;国家自然科学基金30600533;江苏省自然基金BK2008066、BK2006014

在线出版日期：2009-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：44-48