Stx1B基因克隆、表达及重组蛋白的纯化

摘要：

目的 构建志贺样毒素1B亚单位(Stx1B)的原核表达载体,获取高纯度的Stx1B重组蛋白.方法 用PCR法扩增Stx1B,通过基因重组技术克隆入原核表达载体pGEX4T-2,将该重组质粒转化E.coli BL21,IPTG诱导表达,Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化重组蛋白.进行SDS-PAGE电泳分析及Western blot检测.结果 重组质粒经诱导后表达分子量为34 kD的重组蛋白,Western blot检测显示特异性条带,亲和层析柱纯化后得到重组蛋白的纯度在90%左右.结论 成功构建了Stx1B重组质粒,表达并纯化出高纯度重组蛋白,为进一步的生物性质研究奠定了基础.

关键词：志贺样毒素、原核表达、蛋白纯化

所属期刊栏目：25

分类号：R378.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：江苏省青年科技创新人才启动项目BK2007608

在线出版日期：2009-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：23-25