siRNA干扰嘌呤补救合成途径的关键酶对弓形虫增殖的抑制作用

摘要：

目的 探讨siRNA同时干扰嘌呤补救合成途径中两个关键酶对弓形虫增殖速率的影响.方法 将针对腺苷激酶(AK)和次黄嘌呤-黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HXGPRT)的siRNA同时电转染弓形虫,然后将弓形虫接种人包皮成纤维细胞(HFF),24h和40h后Giemsa染色,光镜下计数假包囊内弓形虫速殖子数目,计算弓形虫平均倍增次数.同时将弓形虫进行模拟电转,接种HFF细胞后,不加磺胺嘧啶进行培养作为阴性对照,加入10μg/mL磺胺嘧啶培养作为阳性对照.结果 在接种HFF细胞后24h,4μmol/L的AK siRNA786和HXGPRT siRNA415联合电转弓形虫、阳性对照组及阴性对照组弓形虫的平均倍增次数分别为:1.64±0.95、1.04±0.88及2.32±0.90,前两组与后者相比倍增次数明显减少(P<0.05).在接种后40h,siRNA联合电转弓形虫与阳性对照组弓形虫的平均倍增次数分别为3.00±1.04,2.56±1.04,与阴性对照组相比(3.60±0.80)差异有显著性(P<0.05).结论 嘌呤补救合成途径中的两个关键酶-AK和HXGPRT被其siRNA同时抑制后,弓形虫在细胞内的增殖速率显著减缓.

关键词：弓形虫、嘌呤代谢、腺苷激酶、次黄嘌呤-黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶、RNA干扰、siRNA

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分类号：R531.8(寄生虫病)

资助基金：国家自然科学基金项目30800965;安徽省教育厅高校自然科学基金KJ2008B3291

在线出版日期：2009-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：9-12,16