狂犬病毒载体的构建与鉴定

摘要：

目的 构建狂犬病毒载体,为新型疫苗研究提供依据.方法 将狂犬病毒减毒株SAE基因组分段扩增,然后经逐步拼接得到全基因组克隆,并在其中引入转录终止起始元件和多克隆位点获得重组质粒pSAETOPO.将绿色荧光蛋白(EGFP)基因和西尼罗病毒prME基因分别克隆至pSAETOPO,然后将带有这两个基因的狂犬病毒全长cDNA切下并克隆至pcDNA3.1(+)载体.将获得的重组质粒pcSAE-GFP和pcSAE-ME转染细胞,分别观察辅助病毒对外源基因表达的影响.结果 获得狂犬病毒载体质粒pcSAE-GFP和pcSAE-ME,经酶切分析和序列测定表明所构建克隆是正确的.pcSAE-GFP及pcSAE-ME转染细胞后,在辅助病毒存在下可表达相应外源基因.结论 构建的狂犬病毒载体质粒可表达外源基因,为进一步获得表达外源基因的重组狂犬病毒奠定了基础.

关键词：狂犬病毒、病毒载体、SAE株、绿色荧光蛋白、西尼罗病毒prME蛋白

所属期刊栏目：24

分类号：R393.3

资助基金：国家自然科学基金30471597

在线出版日期：2009-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1047-1051