亚洲牛带绦虫磷脂酰肌醇转移蛋白α基因的克隆表达和免疫学分析

摘要：

目的 原核克隆表达亚洲牛带绦虫成虫磷脂酰肌醇转移蛋白α基因(Ta PITP α),探索其应用前景.方法 将亚洲牛带绦虫成虫PITP α克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL-21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹(Western Blotting)进行免疫学分析.结果 PCR、双酶切及DNA测序结果均表明pET-28a(+)-Ta PITP α重组质粒构建成功.SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠埃希菌BL-21/DE3中获得高效表达,经亲和层析获得了高纯度蛋白.重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清和感染了亚洲牛带绦虫的猪血清识别,表明其具有免疫活性.结论 亚洲牛带绦虫成虫磷脂酰肌醇转移蛋白α基因可在大肠埃希菌BL-21/DE3中获得具有免疫活性的高效表达,为进一步的功能研究奠定了基础.

关键词：亚洲带绦虫、磷脂酰肌醇转移蛋白α、基因克隆、原核表达

所属期刊栏目：24

分类号：R383.3(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30760227 、贵州省科技攻关项目 [黔科合NY字20063037]联合资助

在线出版日期：2009-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1022-1024,1028