结核分枝杆菌Rv0577基因在毕赤酵母的表达及重组抗原活性鉴定

摘要：

目的 在毕赤酵母表达结核分枝杆菌Rv0577基因并鉴定重组蛋白抗原活性.方法 从结核分枝杆菌标准株H37Rv扩增Rv0577基因,TA克隆进入pGEM(R)-T Easy载体,再亚克隆进入pPICZαA.重组质粒pPICZαA-Rv0577经双酶切鉴定并测序证实,线性化后电转化导入毕赤酵母X 33表达;采用Western blot 和Dot blot鉴定抗原活性.结果 双酶切及测序鉴定均证实获得Rv0577基因的正确克隆.pPICZαA-Rv0577在X 33分泌表达的目的 蛋白,通过硫酸铵沉淀、HPLC顺序纯化,获得的纯化蛋白与结核病患者血清进行Dot blot,7份中有3份反应阳性.结论 Rv0577基因在毕赤酵母获得高效表达,重组抗原可被结核病患者血清识别,具有抗原活性.

关键词：结核分枝杆菌、Rv0577、毕赤酵母、基因表达、抗原性

所属期刊栏目：24

分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2009-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1002-1005