弓形虫ITS-1 序列PCR诊断方法的建立

摘要：

目的 本文旨在为弓形虫感染的临床病例检测建立特异性PCR诊断方法.方法 本研究以弓形虫ITS-1序列为种特异性遗传标记,采用有限稀释法稀释速殖子DNA,经PCR扩增,检测该方法的敏感性;用同一引物扩增鸡柔嫩艾美耳球虫原虫和弓形虫,检测PCR方法的特异性.人工感染小鼠和家兔,用组织触片法和PCR方法检测感染动物的组织,并检测10头临床疑似病猪的肺脏、肺门淋巴结、脾脏、肾脏和肝脏等组织,比较两者的敏感性.结果 该PCR方法最低可以检测1pg弓形虫速殖子DNA(相当于10个速殖子的DNA);鸡柔嫩艾美耳球虫原虫未扩增出特异条带,仅弓形虫出现特异条带(300bp).组织触片和PCR方法对人工感染小鼠组织DNA的检出率均为87.5%(7/8),对人工感染家兔的检出率分别为50%(3/6)和66.7%(4/6),对临床疑似弓形虫病猪检测的阳性率均为20%,两种方法的检查结果基本一致.结论 本试验结果表明,PCR技术可以作为弓形虫感染动物的诊断与检测方法.

关键词：弓形虫、PCR、ITS-1

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分类号：R382.5(医学寄生虫学)

资助基金：公益性行业农业科研专项经费项目200803017;江苏省自然科学基金重点项目BK2007711;江苏省农业三项工程项目SX2007082

在线出版日期：2008-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：446-450