10.3969/j.issn.1002-2694.2008.04.019
细粒棘球绦虫重组CTxB-Eg95(TP)融合蛋白的原核表达
目的 构建CTxB-Eg95(TP)融合基因原核表达载体,并诱导表达CTxB-Eg95(TP)融合蛋白.方法 采用PCR技术分别克隆CTxB基因和141bp的Eg95基因片段序列Eg95(TP)并鉴定.分别将两个基因片段定向克隆到大肠杆菌表达载体pET28a(+)中,构建pET-CTxB-Eg95(TP)重组质粒.将鉴定为阳性的重组质粒转化E.Coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE电泳鉴定.结果 测序结果表明已成功构建CTxB-Eg95(TP) 融合基因的原核表达载体,SDS-PAGE电泳结果显示,转染pET-CTxB-Eg95(TP)的E.Coli BL21(DE3)菌经IPTG诱导可表达大小约23.5kDa的特异蛋白条带,与预期结果一致.结论 CTxB-Eg95(TP) 融合基因获得了高水平的表达,为Eg95的表位研究和应用于口服疫苗奠定了基础.
Eg95(TP)基因序列、霍乱毒素B亚单位、融合基因、原核表达
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R383.3(医学寄生虫学)
甘肃省农牧厅资助项目GNSW-2004-12
2008-06-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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