10.3969/j.issn.1002-2694.2008.01.014
湖北钉螺酚氧化酶的部分纯化及酶学特征
目的 制备并纯化钉螺酚氧化酶,探讨该酶最适pH、最适温度及其底物专一性等特征.方法 利用匀浆、离心等方法 制备粗制酚氧化酶酶液,用盐析、凝胶层析进行酶液纯化;在不同pH、不同温度下测定该酶比活力,寻求最适pH、最适温度;根据测定不同底物(邻苯二酚、L-多巴、焦没食子酸)对该酶的酶促反应米氏常数(Km),判定其底物专一性.结果 经纯化后酶活力提高了13.62 倍.该酶对邻苯二酚、L-多巴和焦性没食子酸的Km值分别为5.66±0.84 mmol/L、4.72±0.45 mmol/L和20.64±2.36 mmol/L(前两者比较P>0.05,分别与后者比较P均小于0.05).酚氧化酶在pH 6.0、40 ℃时活性最高.结论 通过盐析、凝胶过滤层析等方法 纯化可使酶活性明显提高;钉螺酚氧化酶对邻苯二酚的亲和力近似于L-多巴,两者均高于对焦性没食子酸的亲和力.
钉螺、酚氧化酶、纯化、生化活性
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R383.2(医学寄生虫学)
2008-05-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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