HEV ORF3真核表达载体的构建、鉴定和真核表达

摘要：

目的 构建表达戊型肝炎病毒(HEV)ORF3-pXF2RH融合蛋白的真核表达载体;获得重组质粒稳定转染的L02细胞系.方法 利用PCR技术从HEV基因组中扩增出ORF3基因片断,Hind Ⅲ/EcolⅠ双酶切后连接到经同样酶切的pXF2RH真核表达载体,转化DH5α菌株感受态细胞,获得阳性重组质粒ORF3-pXF2RH.将阳性克隆用脂质体法转染L02细胞系,G418筛选抗性克隆,SDS-PAGE、Western blot分析鉴定ORF3-pXF2RH融合蛋白的表达.结果 真核表达质粒转染L02细胞,SDS-PAGE显示在28.5kD左右蛋白表达量明显高于对照组,Western blot在28.5kD左右有一条强的棕色条带.结论 成功构建ORF3-pXF2RH真核表达质粒,在L02细胞表达融合蛋白,为进一步研究该蛋白生物学功能奠定了基础.

关键词：肝炎病毒、病毒融合蛋白质、真核表达、凋亡、增殖

所属期刊栏目：23

分类号：R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2007-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：985-987