双曲钩端螺旋体溶血素基因tlyA的克隆、表达及初步功能鉴定

摘要：

目的 研究双曲钩端螺旋体(简称双曲钩体)是否含有溶血素基因,并鉴定其溶血活性.方法 对双曲钩体LEBIa2503基因编码产物进行结构域预测、序列比对后,PCR扩增目的片断,克隆到原核表达载体pET28b(+),转化宿主细胞,并诱导表达产物进行初步功能鉴定.同时,以RT-PCR检测LEBIa2503的转录情况.另外,也对双曲钩体菌体本身有无溶血活性进行检测.结果 双曲钩体LEBIa2503基因与问号钩体tlyA溶血素基因在蛋白水平上有相同的结构域,属于直系同源基因(orthologues gene).原核表达的重组融合蛋白在羊血平板上出现β-溶血环.以RT-PCR的方法能检测到在双曲钩体中有LEBIa2503基因的转录,但双曲钩体菌体本身则检测不到溶血活性.结论 未发现双曲钩体有溶血活性,但其含有溶血素基因tlyA,并且在普通培养环境下能被转录,这对进一步研究其内在机制奠定了基础,并对探索致病性问号钩体致病机制提供了一定线索.

关键词：双曲钩端螺旋体、溶血素、tlyA基因、原核表达

所属期刊栏目：23

分类号：R377.5(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30370071&30670102;上海市重点学科建设项目T0206

在线出版日期：2007-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：739-744