10.3969/j.issn.1002-2694.2007.07.023
阴道毛滴虫病毒衣壳蛋白基因cap2037的克隆与表达
目的 对阴道毛滴虫病毒衣壳蛋白基因的克隆与原核表达.方法 提取阴道毛滴虫总核酸为模板,根据所克隆的阴道毛滴虫病毒部分序列和GenBank中发表的阴道毛滴虫病毒TvV-T1序列设计一对引物,经RT-PCR得到与预计大小一致的PCR特异性产物,将其克隆到pMD-18T载体后测序,并与GenBank中核苷酸序列进行同源性搜索与分析,再将其克隆至表达载体pET28a.并以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.结果 目的基因片段长度为2 037bp,与阴道毛滴虫病毒T1株(U08999)的同源性最高为82.9%,构建原核表达载体pET-Cap2037;IPTG诱导后,SDS-PAGE显示表达产物的大小约75kDa.结论 成功克隆出阴道毛滴虫病毒衣壳蛋白基因序列,与TVV-T1株序列有82.9%的同源性,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表明,75kDa蛋白基因在大肠杆菌BL21(DE3)中得到高效表达.
阴道毛滴虫病毒、衣壳蛋白、克隆、原核表达
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R382.2(医学寄生虫学)
国家自然科学基金39600110;总后勤部留学回国人员基金98H025
2007-08-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
718-721,724