抗结核分枝杆菌38kD抗原单克隆抗体的制备及荧光抗体检测方法的建立

摘要：

目的 制备抗结核分枝杆菌单克隆抗体,经纯化后标记荧光素,建立直接免疫荧光法用于痰标本的结核分枝杆菌检测.方法 常规方法制备单克隆抗体.ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株,用免疫印迹法确认.单克隆抗体采用饱和硫酸铵粗提和Sephadex G-50层析纯化.单抗纯化后采用直接法标记异硫氰酸荧光素,标记后的荧光抗体用于临床痰涂片结核分枝杆菌的检测.结果 经筛选获得4株单克隆抗体杂交瘤细胞株.ELISA检测小鼠腹水单克隆抗体效价达到1:6 400-1:12 800.免疫印迹实验表明4株单抗均为抗结核分枝杆菌38 kDa蛋白单抗,其中两株产生较强的免疫反应条带.采用异硫氰酸荧光素标记纯化的单抗,建立直接免疫荧光检测法,对41份结核病患者的痰标本进行检测,阳性率为90.24%,与抗酸染色法比较,直接荧光检测法敏感性显著高于抗酸染色法(P＜0.05).结论 应用抗结核分枝杆菌38kDa蛋白的单克隆抗体,建立直接免疫荧光检测法,应用于临床痰标本结核分枝杆菌检测,对于辅助诊断结核病具有一定价值,

关键词：结核分枝杆菌、单克隆抗体、直接免疫荧光检测

所属期刊栏目：23

分类号：R378.91(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2007-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：459-461,473