问号钩体lipL32/1-lipL41/2融合基因的构建及其表达产物免疫性的鉴定

摘要：

目的 构建问号钩端螺旋体(简称钩体)lipL32/1-lipL41/2融合基因及其原核表达系统并鉴定其表达产物的免疫性.方法 采用连接引物PCR构建lipL32/1-lipL41/2融合基因,常规方法构建其原核表达系统.采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检测目的重组蛋白rLipL32/1-LipL41/2表达情况.采用Western blot鉴定rLipL32/1-LipL41/2的免疫反应性.采用ELISA检测228例钩体病人血清中lipL32/1、lipL41/2基因和lipL32/1-lipL41/2融合基因表达产物的抗体.结果 lipL32/1-lipL41/2融合基因核苷酸和氨基酸序列与报道的相关序列相似性分别为99.9%和99.8%.rLipL32/1-LipL41/2表达量约为细菌总蛋白的10%.rLipL32/1和rLipL41/2兔抗血清均能识别并与rLipL32/1-LipL41/2结合.97.4%、78.5%和99.1%病人血清rLipL32/1、rLipL41/2和rLipL32/1-LipL41/2抗体阳性.结论 本研究成功地构建了问号钩体lipL32/1-lipL41/2融合基因及其原核表达系统,rLipL32/1-LipL41/2不仅同时具有两个单一重组抗原的免疫反应性,且能提高钩体病人血清中抗体检测阳性率,可作为研制钩体属特异性基因工程疫苗或检测试剂金的候选抗原.

关键词：问号钩端螺旋体、lipL32 基因、lipL41 基因、融合基因、构建/表达、免疫性

所属期刊栏目：23

分类号：R383.1(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金30370072;Key Project of Science and Technique Plan of Zhejiang Province2006C24003

在线出版日期：2007-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：427-432