马尔尼菲青霉酵母相消减cDNA文库的构建及初步筛选

摘要：

目的 构建马尔尼菲青霉酵母相抑制性消减cDNA文库,寻找其在酵母相中的差异表达基因.方法 分别提取马尔尼菲青霉菌丝相和酵母相的总RNA并合成cDNA,然后应用抑制性消减杂交技术(SSH),以酵母相为tester(检测子),菌丝相为driver(驱赶子),连接不同的接头,通过两轮杂交和两次抑制性PCR后,将产物与T载体连接并转染大肠杆菌.经PCR鉴定,共得到480条插入片段.序列分析和同源性比较表明一些基因与细胞壁抗原、转运蛋白、氧化还原酶等具有同源性.结果 成功构建了一个以酵母相为tester(检测子)的抑制性消减cDNA文库.结论 所构建的cDNA消减文库为进一步筛选马尔尼菲青霉致病相关基因奠定了基础.

关键词：马尔尼菲青霉、抑制性消减杂交、聚合酶链反应

所属期刊栏目：23

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2007-04-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：218-221,226