期刊专题

10.3969/j.issn.1002-2694.2007.02.007

马鹿布氏杆菌25kDa外膜蛋白基因的克隆、序列分析及其表达研究

引用
目的 克隆马鹿布氏杆菌ML分离株25kDa外膜蛋白(Omp25)基因,并在大肠杆菌中表达.方法 运用RT-PCR技术从马鹿布氏杆菌分离株中扩增出Omp25基因,将其克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定和遗传变异分析,并将目的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中诱导表达.结果 该基因全长642bp,编码213个氨基酸;其中前23个氨基酸残基构成信号肽.在推导的氨基酸序列中,存在两个跨膜区,但没有潜在的N-联糖基化位点.与GenBank中已经登录的布氏杆菌其他11个分离株相比,马鹿布氏杆菌分离株Omp25基因变异较小,以散在的点突变为主,Omp25基因核苷酸和推导氨基酸序列的同源性分别为99.1%-99.4%和99.2%-99.5%之间.转化重组质粒pETOMP25的大肠杆菌BL21(DE3)在IPTG的诱导下,可表达出具有反应原性的目的蛋白,表达量占菌体蛋白的18.6%.结论 马鹿布氏杆菌分离株与流产型布氏杆菌其它分离株Omp25基因同源性很高,可能是一个毒力较强的野毒株.

马鹿布氏杆菌、25kDa外膜蛋白基因、克隆、序列分析、表达

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R3(基础医学)

2007-04-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共5页

128-131,135

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中国人兽共患病学报

1002-2694

35-1284/R

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2007,23(2)

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