乙型脑炎病毒膜蛋白B区多肽抗原的表达、纯化及血清学评价

摘要：

目的 在原核表达系统中对乙型脑炎病毒包膜糖蛋白(E蛋白)的B区多肽抗原进行高效表达、纯化及血清学评价.方法 利用PCR技术从乙脑减毒活疫苗中扩增编码B区的DNA片段,酶切消化后连接到表达载体pET22b上,用此连接产物转化大肠埃希菌BL21(DE3)并表达B区多肽抗原,表达产物经液相层析纯化;用乙脑病人血清对纯化后的B区多肽抗原进行评价.结果 重组质粒pET22b-JEB经双酶切,其插入的外源基因片段为372 bp,与预期DNA片段大小一致.将纯化前与纯化后的蛋白作SDS-PAGE电泳,均可见一条约16kD的外源基因蛋白带,与计算的相对分子质量相符.经WB和ELISA血清学评价,表明重组B区多肽抗原具有较高的灵敏性及特异性.结论 成功构建了表达载体pET22b-JEB,在原核系统中表达的B区多肽抗原具有良好的血清学检测价值.

关键词：乙型脑炎病毒、包膜糖蛋白B区、原核表达系统、蛋白纯化

所属期刊栏目：23

分类号：R5(内科学)

资助基金：广东省医学科学技术研究基金WSTJJ20021210440102196303133230

在线出版日期：2007-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：53-55,82