多房棘球绦虫pBCG-Em14-3-3重组质粒的构建及其在BCG中的表达

摘要：

目的 构建多房棘球绦虫重组质粒pBCG-Em 14-3-3,并转化BCG进行表达.方法 超声粉碎泡球蚴组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增Em 14-3-3抗原编码基因;将该扩增产物定向克隆到大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pBCG,构建重组质粒pBCG- Em 14-3-3;电穿孔法转化BCG,构建多房棘球绦虫重组BCG- Em 14-3-3.免疫印迹分析pBCG- Em 14-3-3的表达产物.结果 RT-PCR成功扩增出779bp的Em 14-3-3抗原编码基因;双酶切证实Em 14-3-3抗原编码基因成功插入pBCG中;PCR证实rBCG- Em 14-3-3构建成功;免疫印迹分析发现pBCG- Em 14-3-3的表达产物在相对分子质量(Mr)约为27×103处有明显的目的蛋白表达条带,且能被活动性泡球蚴病鼠血清特异识别.结论 成功构建了多房棘球绦虫重组BCG- Em 14-3-3.

关键词：多房棘球绦虫、重组pBCG-Em14-3-3、BCG、构建、表达效率

所属期刊栏目：22

分类号：R383.3(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金30500423;教育部科学技术研究项目205131;重庆市教委资助项目KJ050313;重庆市科委科研项目03-43-8;重庆市卫生局资助项目03-2-099

在线出版日期：2007-01-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1111-1114