秦川黄牛成熟朊蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要：

目的 制备及鉴定抗秦川黄牛成熟朊蛋白的单抗.方法 用重组成熟朊蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,以间接ELISA方法筛选能够稳定分泌抗成熟朊蛋白的单抗的杂交瘤细胞株.以亲和层析法纯化腹水抗体,检测其Ig类和亚类、效价、相对亲和力以及特异性,并用基因片段表达作图法初步分析抗原表位.结果 获得了能够稳定分泌抗牛成熟朊蛋白的杂交瘤细胞株N64,分泌的抗体属于IgG2a,腹水效价为1×105,相对亲和力为0.15μg/ml,Western blot表明该单抗具有较强的特异性.表位分析显示N64单抗仅与羧基端重组朊蛋白反应.结论 抗牛成熟朊蛋白的腹水单抗N64效价高、亲和力和特异性强,可以作为疯牛病免疫诊断的核心试剂.

关键词：牛海绵样脑病、成熟朊蛋白、单克隆抗体、间接ELISA

所属期刊栏目：22

分类号：R3(基础医学)

资助基金：甘肃省科技攻关项目2GS042-A41-001-09;甘肃省自然科学基金;中国博士后科学基金20040350585;中国农科院兰州兽医研究所所长基金

在线出版日期：2006-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：851-854