刚地弓形虫P30(SAG1)重组抗原的高效表达和体外纯化

摘要：

目的表达和纯化弓形虫P30(SAG1)蛋白,为弓形虫病快速诊断试剂盒及蛋白质疫苗的研制奠定基础.方法 PCR法从弓形虫基因组DNA 中扩增 P30基因片段,P30产物克隆到表达质粒pET-30a(+) 构建重组载体,将其转化到DH5α中.经PCR扩增和质粒酶切及基因测序鉴定后,阳性重组质粒转化到大肠埃氏菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定.大量的诱导表达产物用SNBC 3S NTA Resin方法纯化并进行复性.结果扩增的P30基因片段为750bp, 重组表达融合蛋白量单位为30ku,与理论值相符.结论成功构建重组体,获得纯化和复性的弓形虫主要表面抗原P30的高效表达产物,为弓形虫病的诊断和疫苗研究奠定了基础.

关键词：刚地弓形虫、P30基因、融合蛋白纯化

所属期刊栏目：21

分类号：R382.5(医学寄生虫学)

在线出版日期：2006-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1089-1093