弓形虫主要表面抗原P30两个不同片段的重组表达、纯化及应用

摘要：

目的将刚地弓形虫(简称弓形虫)主要表面抗原P30基因两个不同片段重组表达,纯化所获重组蛋白用于弓形虫病免疫学诊断.方法根据弓形虫P30基因的全长序列,用PCR法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出P30基因的两个不同片段,并构建相应克隆进行诱导表达,表达蛋白以western blot鉴定.用Amylose Resin以亲和层析法纯化所表达的蛋白.以弓形虫RH株感染家兔,用粗抗原和纯化重组抗原以ELISA法比较检测各种寄生虫病患者、感染家兔血清及疟原虫感染小鼠血清.结果 1.成功构建相应克隆,并成功诱导表达,表达产物经纯化后获得高纯度目的蛋白.2.重组抗原与粗抗原相比,具有相同的敏感性和更高的特异性.结论成功获得弓形虫主要表面抗原P30的2个表达产物,以此重组抗原与粗抗原对比检测弓形虫相应抗体,结果证明重组抗原特异性高于粗抗原.

关键词：刚地弓形虫、重组抗原、PCR、检测、ELISA

所属期刊栏目：21

分类号：R382.5(医学寄生虫学)

在线出版日期：2005-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：965-967,944