羊布鲁氏菌BCSP31、OMP31、L7/L12基因的原核表达载体构建及表达

摘要：

目的构建羊布鲁氏菌外膜蛋白BCSP31、OMP31和L7/L12基因的重组表达质粒,并在原核系统中表达.方法根据羊布鲁氏菌M5株外膜蛋白BCSP31、OMP31和抗原L7/L12蛋白基因序列设计引物,分别扩增出大小约为1kb、730bp和380bp的目的基因片断,插入pGEM7Zf(+)中测序并进行分析.将3种基因片段亚克隆入pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,用SDS-PAGE及Western-blot进行分析鉴定.结果 SDS-PAGE结果表明3个目的蛋白均以融合蛋白的方式成功表达,在相对分子量57kDa、49kDa、38kDa处有表达条带,经薄层扫描分析,目的蛋白分别占全菌蛋白的42%、36%、40%.Western-blot证实3种融合蛋白均能被布鲁氏菌免疫兔血清识别.结论成功构建了3种蛋白的表达载体并进行了高效表达,3种蛋白均具有良好的免疫原性.

关键词：羊布鲁氏菌、BCSP31蛋白、OMP31蛋白、L7/L12蛋白、基因表达

所属期刊栏目：21

分类号：R378.5(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：第四军医大学校科研和教改项目05XJZ006

在线出版日期：2005-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：961-964