弓形虫致密颗粒蛋白基因的表达及其重组蛋白免疫反应性的评价

摘要：

目的将克隆入pGEX-4T-1的致密颗粒蛋白基因进行表达并对表达产物的免疫反应性进行评价.方法将重组表达质粒pGEX-4T-1/GRA7转入大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导进行SDS变性蛋白质电泳,分别以Anti-GST Antibody、免抗弓形虫阳性血清和人抗弓形虫阳性血清为一抗进行Western Blot分析.用GSTrap FF HiTrap affinity columns纯化重组蛋白,以此蛋白作为包被抗原,BLISA法检测抗弓形虫阴性、阳性血清.结果 SDS变性蛋白质电泳显示在43KDa～66KDa蛋白条带之间有特异蛋白的表达,蛋白分子量大小与理论值相符.Western Blot分析表明该重组蛋白为GST融合蛋白,且该蛋白能被人抗弓形虫阳性血清、兔抗弓形虫阳性血清所识别.ELISA结果表明该蛋白能与人抗弓形虫阳性血清、兔抗弓形虫阳性血清特异结合,而与抗弓形虫阴性血清无反应.结论弓形虫致密颗粒蛋白基因在大肠埃希菌中得到表达;该重组蛋白具有良好的免疫反应性.

关键词：刚地弓形虫、致密颗粒蛋白7、基因表达、免疫反应性、酶联免疫吸附试验

所属期刊栏目：21

分类号：R382.5(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金301708377;中山医学院校科研和教改项目

在线出版日期：2005-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：119-121,114