家蝇幼虫脂肪体cDNA文库的构建及初步鉴定

摘要：

目的构建家蝇幼虫cDNA文库.方法以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌免疫诱导24h后的家蝇三龄幼虫为实验材料,从其脂肪体中提取总RNA,运用SMART(switching mechanism at 5, end of mRNA transcript)技术构建家蝇幼虫cDNA文库.结果初步测定,原始文库的滴度为1.34×106pfu/ml,原始文库重组率为98.9%,文库扩增后滴度达2.408×109 pfu/ml.从扩增文库随机挑取12个克隆进行PCR扩增鉴定,结果显示所选的12个噬菌体克隆均含有重组的cDNA,插入片段大小为400bp～1 500bp之间.结论成功构建了家蝇幼虫cDNA文库.

关键词：家蝇、cDNA文库、SMART技术、构建

所属期刊栏目：21

分类号：R384.2(医学寄生虫学)

资助基金：广东省科技厅科技计划2003B31602;广东省广州市科技局社会发展科技攻关项目2003J1-C0021

在线出版日期：2005-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：52-55