钩端螺旋体OmpL1抗原表位预测、克隆和表达

摘要：

目的应用生物信息学方法预测钩体外膜蛋白OmpL1的表位,结合基因工程手段进行表位重组、表达和分离纯化.方法用预测程序ProPred和 ANTIGENIC预测OmpL1的表位,PCR合成重组表位基因片段,克隆PCR产物构建表达质粒pGEX/Omp-Omp,测序验证.对含有该质粒的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物western blot分析并纯化融合蛋白. 结果预测到2个既具有MHC结合肽特性又具有B细胞表位特征的肽段.重组表位基因序列与理论设计完全一致.IPTG诱导BL21(DE3)中高效表达Mr约30 000的融合蛋白,纯化后蛋白纯度＞90%. 结论成功构建原核表达质粒pGEX/Omp-Omp,并进行含重组表位的GST融合蛋白的分离纯化,为OmpL1的表位研究和应用于亚单位疫苗奠定了基础.

关键词：OmpL1、抗原表位、钩端螺旋体

所属期刊栏目：21

分类号：R377(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划;国家自然科学基金30370071,30300197

在线出版日期：2005-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：27-31