弓形虫GRA4基因真核表达重组质粒的构建与表达

摘要：

@@ 构建弓形虫致密颗粒蛋白GRA4的真核表达质粒,并研究其在HEK-293细胞中的表达情况.采用PCR方法自弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA4基因片段,定向克隆入真核表达载体pVAC,构建pVAC-GRA4重组质粒;利用脂质体介导的转染技术,将其导入HEK-293细胞,RT-PCR法检测mRNA表达情况,Western-blot法鉴定表达产物.从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出GRA4基因片段,成功构建重组表达质粒pVAC-GRA4;转染GRA4的HEK-293细胞,RT-PCR检测可见一条约987bp的目的条带,表达产物经Western-blot鉴定,其分子量约为41kD,能被pET-GRA4重组蛋白免疫血清所识别.构建的真核表达质粒pVAC-GRA4能在HEK-293细胞中表达,为弓形虫疫苗的进一步研究打下基础.

机标关键词：弓形虫、基因片段、真核表达重组质粒、真核表达质粒、细胞、构建、重组表达质粒、致密颗粒蛋白、真核表达载体、基因组、脂质体介导、转染、重组蛋白、免疫血清、扩增、鉴定、检测、定向克隆、分子量、疫苗

所属期刊栏目：20

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2005-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：89-90