重组弓形虫GRA8的表达及其诱导的免疫应答

摘要：

@@ 表达和纯化弓形虫RH株GRA8的截短型片段,分析其诱导的免疫应答.从重组克隆pMD18-GRA8中切取GRA8的插入片段,亚克隆至原核表达质粒pET-23a(+)中,转化大肠杆菌BL21,PCR和酶切鉴定转化菌落的插入序列;将构建的原核表达菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达;大量诱导表达GRA8,金属螯合层析予以纯化,将纯化蛋白免疫小鼠,观察其诱导的免疫应答.GRA8基因的特异片段被亚克隆到原核表达质粒pET-23a(+),在大肠杆菌中未见GRA8的明显表达;表达的蛋白经金属螯合层析获得纯化;纯化蛋白能被弓形虫感染兔血清识别.成功构建了GRA8的原核重组表达质粒,纯化的蛋白具有良好的抗原性.

机标关键词：重组表达质粒、弓形虫感染、原核表达质粒、纯化蛋白、免疫应答、金属螯合、转化大肠杆菌、亚克隆、表达和纯化、重组克隆、重组蛋白、诱导表达、特异片段、酶切鉴定、构建、蛋白免疫、插入序列、插入片段、层析、兔血清

所属期刊栏目：20

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2005-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共1页

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