粉尘螨cDNA文库的构建

摘要：

目的构建粉尘螨cDNA表达文库.方法提取粉尘螨总RNA和mRNA,以NotI dT18 作为引物反转录合成第一链,置换法合成第二链.加EcoRI接头,经NotI酶切后,应用定向克隆技术将相应dscDNA片段插入λExCell/Not I/EcoR I/CIP载体的Not I和EcoRI双酶切位点间,经包装、转染宿主菌,构建成cDNA文库.检测文库库容量和重组效率,并采用PCR方法对插入片段大小进行分析.结果已成功构建一个含4.8×105个重组子的cDNA表达文库,重组率为100%,插入片段大小平均约1.2kb.结论所建文库容量及插入片段大小适合对粉尘螨特异性重组变应原的进一步研究.

关键词：粉尘螨、cDNA文库、构建

所属期刊栏目：20

分类号：R1(预防医学、卫生学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2002AA214011;国家自然科学基金30271226,30260101;广东省科技厅科技计划104019;广东省深圳市科技计划

在线出版日期：2004-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：923-925