马链球菌兽疫亚种中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的克隆与表达

摘要：

目的构建马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的重组表达质粒(pET-Szp),并检测表达产物的免疫反应性.方法根据GenBank登录的马链球菌兽疫亚种纽约分离株w60类M蛋白基因序列设计和合成引物,以该菌中国分离株ATCC35246的基因组DNA为模板,扩增类M蛋白基因5'端第583～1068bp片段,并按正确的阅读框架定向克隆到表达载体pET-32a(+)中,将重组质粒转化大肠杆菌BL21株,用IPTG诱导表达,并通过SDS-PAGE和免疫印迹对表达蛋白进行初步分析.结果扩增出486bp的马链球菌兽疫亚种ATCC35246的类M蛋白基因片段,该基因在大肠杆菌表达系统中经诱导,得到分子量为50 000的表达产物,免疫印迹表明该产物具有特异的免疫反应性.结论成功构建了表达马链球菌兽疫亚种中国株类M蛋白片段的重组表达质粒,并实现在大肠杆菌中表达,为重组类M蛋白亚单位疫苗的研制奠定了基础.

关键词：马链球菌兽疫亚种、类M基因、克隆和表达

所属期刊栏目：20

分类号：R378.99(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划G1999011906

在线出版日期：2004-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：633-636