幽门螺杆菌粘附素与大肠杆菌LtB融合疫苗的口服免疫与预防试验

摘要：

目的观察幽门螺杆菌粘附素HpaA与大肠杆菌LtB融合蛋白质经口服免疫BALB/c小鼠后机体产生的免疫应答和蒙古沙鼠免疫预防作用.方法用PCR方法扩增HpaA和LtB目的基因片段,将LtB与pPIM质粒连接后,再与HpaA基因连接,转化大肠杆菌DH5α,经酶切获得含有ltB-hpaA的pPIM-ltB/hpaA融合质粒.将重组质粒转化E.coli BL21(DE3),筛选获得重组工程菌,经发酵、包涵体提取,复性,纯化获得LtB-HpaA.BABL/c小鼠设正常对照组、单独rHpaA对照组、CT+ HpaA实验组、融合蛋白LtB-HpaA组和rLtB+rHpaA实验组,免疫4周后检测血清抗原特异性IgG、IgA和胃冲洗液、肠冲洗液中sIgA.蒙古沙鼠分3个实验组,正常对照(PBS)组,单独HpaA免疫组和LtB-HpaA组,免疫4周,于末次免疫后14天灌活力良好的H.pylori SS1活菌,1个月处死动物,采集标本,用细菌培养和病理切片检查评价蒙古沙鼠的免疫保护作用.结果融合蛋白LtB-HpaA组及将CT和LtB作为外粘膜佐剂的CT+HpaA组和LtB+HpaA组中血清IgA和IgG、胃冲洗液和肠冲洗液中sIgA含量明显高于单独HpaA组和对照组,差异非常显著(P＜0.001).蒙古沙鼠融合蛋白rLtB-HpaA组比单纯rHpaA组效果明显(rLtB-HpaA组保护率为80%,单独rHpaA为20%).结论融合蛋白质LtB-HpaA经口服免疫后可以刺激机体产生较高滴度的特异性抗体并使蒙古沙鼠产生较好的预防保护作用.LtB-HpaA可以作为预防和治疗幽门螺杆菌感染的候选口服疫苗株.

关键词：幽门螺杆菌、粘附素、LtB、融合蛋白质、口服疫苗、免疫应答

所属期刊栏目：20

分类号：R378.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家科技攻关项目96-901-01-54;国家高技术研究发展计划863计划2001AA215161

在线出版日期：2004-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：577-581