普氏立克次体120kDa表面抗原N段基因的克隆与表达

摘要：

目的克隆和表达普氏立克次体(Rickettsia prowazekii)120kDa外膜蛋白N段基因.方法采用PCR方法,从普氏立克次体基因组中扩增其120kDa表面抗原N段基因片段,将其与原核表达载体pQE30连接,构建重组质粒pQE30/26kDa,将重组质粒转入大肠杆菌,用IPTG诱导大肠杆菌内的目的基因表达.结果获得长为717bp的PCR片段,序列分析结果与已知普氏立克次体120kDa表面抗原基因一致;SDS-PAGE检测表达产物,在相对分子量26.3kDa处有一表达带;免疫印迹分析证明它能与普氏立克次体免疫兔血清反应;经双波长薄层扫描分析,目的蛋白占全菌体蛋白的20%;提取表达菌体包涵体检查,证明目的蛋白主要存在于包涵体中.结论普氏立克次体120kDa表面抗原N段基因在大肠杆菌中获得了高效表达,该重组蛋白具有良好的免疫反应性.

关键词：普氏立克次体、基因重组、表面抗原

所属期刊栏目：20

分类号：R376(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2004-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：211-213