弓形虫GRA6抗原基因的克隆与表达

摘要：

目的在大肠杆菌中高效表达弓形虫抗原GRA6.方法采用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫昆山分离株和RH株总DNA中分别扩增到编码GRA6的基因,经DNA序列分析后导入表达载体PGEX-5X-3,然后在大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RP中进行表达,以SDS-PAGE和Westen blotting进行鉴定,用GST亲和层析柱纯化表达产物.结果1.在我们所比较的336个碱基中,弓形虫昆山分离株与RH株之间碱基基本一致.2.得到一分子量为49kDa的融合蛋白,占大肠杆菌总蛋白的25.55%,通过Westen blotting证实,该重组抗原能被弓形虫感染的人特异性IgM和IgG血清所识别.结论1.弓形虫昆山分离株和RH株的GRA6基因片段几乎完全一致;2.在大肠杆菌中得到了高效表达的融合蛋白;3.该重组抗原能被弓形虫感染的人特异性IgM和IgG血清所别,可用于构建具有高度敏感性和特异性的弓形虫病检测试剂盒.

关键词：弓形虫、致密颗粒抗原-6、聚合酶链反应、基因表达

所属期刊栏目：19

分类号：R382.5(医学寄生虫学)

在线出版日期：2003-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：50-54