血吸虫磷酸丙糖转移酶基因的克隆及表达

摘要：

目的对血吸虫磷酸丙糖转移酶基因进行克隆及原核表达,以寻找新的预防日本血吸虫感染的疫苗候选分子.方法用血吸虫病人阳性混合血清经大肠杆菌预吸收后对日本血吸虫童虫cDNA文库进行免疫学筛选,所获阳性克隆测序后,送GenBank BLAST进行蛋白质序列同源性比较,证实与其它物种的磷酸丙糖转移酶有很高的同源性.将其克隆入pGEM-T载体质粒,再定向亚克隆入pBK-CMV表达质粒载体上经IPTG诱导表达后,用SDS-PAGE和Western-blot分析和鉴定表达产物.结果用PCR和EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切鉴定均证实TPM基因的重组成功,表达产物为32kD的融合蛋白,表达产物可被免疫阳性血清识别.结论首次成功构建编码日本血吸虫磷酸丙糖转移酶基因表达载体克隆,为进一步研究其作为疫苗分子的可能性奠定基础.

关键词：日本血吸虫、磷酸丙糖转移酶、基因表达

所属期刊栏目：18

分类号：R383.2+4(医学寄生虫学)

资助基金：安徽省科技厅资助项目0022031;安徽省教育厅科研项目99jj01112

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：25-28