猪囊尾蚴抗原cC1在巴斯德毕赤酵母中的表达

摘要：

目的克隆并在巴斯德毕赤酵母中表达猪囊尾蚴抗原cC1.方法用PCR法在cC1cDNA5′端引入所需限制酶位点和酵母分泌信号肽,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-cC1.采用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 PCR产物经测序无误,pPIC9-cC1和pPIC9k-cC1酶切分析与预期相符,获取863个酵母阳性重组克隆及9个高拷贝转化子.表达产物cC1的分子量约42kDa,占分泌总蛋白80%以上,产物浓度为200-350mg/L.Western blot证实表达产物具有天然cC1分子的免疫原性.结论在巴斯德毕赤酵母中成功表达了猪囊尾蚴cC1抗原,为进一步研究打下基础.

关键词：cC1cDNA、克隆表达、巴斯德毕赤酵母

所属期刊栏目：18

分类号：R383(医学寄生虫学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划101-06-0504

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：31-33，67