弓形虫多表位基因的构建及其在大肠杆菌系统中的表达鉴定

摘要：

目的构建弓形虫和破伤风毒素多个表位的编码基因,将其在大肠杆菌系统进行表达,评价重组抗原的特异反应性.方法从弓形虫保护性抗原及通用免疫增强佐剂破伤风毒素中选取含有T和(或)B细胞表位的抗原片段,通过软件分析在各片段之间插入适当数目、起间隔作用的氨基酸,以保持个片段的空间构象独立性,从而确定氨基酸顺序.根据氨基酸序列选取适当的密码子构成弓形虫多表位基因.将该基因合成并鉴定后,亚克隆入原核表达载体,在大肠杆菌中表达并分析表达产物的表达形式和抗原活性.结果成功构建了长度为360bp的弓形虫多表位基因.该基因在原核表达系统中经诱导,得到了14.4kDa的包涵体形式的表达产物.免疫印迹实验表明该产物具有强特异性抗原活性.结论弓形虫多表位基因在原核中的表达产物在弓形虫病疫苗及诊断中有潜在的应用价值.

关键词：弓形虫、多表位、大肠杆菌、蛋白表达、抗原活性

所属期刊栏目：18

分类号：R382.5(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金30080024;广东省自然科学基金001052

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：37-40,16