结核杆菌Ag85A及ESAT-6双价抗原融合表达载体的构建及其在大肠杆菌中的高效表达

摘要：

目的为结核病新型疫苗研究提供靶基因和靶抗原.方法采用PCR扩增的方法获得结核杆菌两种免疫保护性抗原Ag85A及ESAT-6的基因,将其定向克隆入真核及原核穿梭表达型载体pBK-CMV构建含嵌合目的基因的重组质粒,转化大肠杆菌后用IPTG进行诱导表达,并通过SDS-PAGE和Western-blotting对表达蛋白进行初步分析.结果 1)从结核杆菌H37Rv株基因组DNA中扩增出Ag85A及ESAT-6基因.2)成功构建了结核杆菌Ag85A及ESAT-6双价抗原融合表达质粒pBK-85A-E6.3)重组质粒pBK-85A-E6经IPTG诱导后能在大肠杆菌中稳定表达38kDa的融合蛋白.结论成功构建了结核杆菌Ag85A及ESAT-6双价抗原融合表达载体,并在大肠杆菌中实现了稳定表达,为进一步研究其在结核病基因工程疫苗研制中的应用奠定了基础.

关键词：结核杆菌、Ag85A、ESAT-6、融合表达

所属期刊栏目：18

分类号：R378.91+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：高等学校博士学科点专项科研项目2000063006

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：28-31