白纹伊蚊细胞色素P450CYP6N3基因的原核表达及鉴定

摘要：

目的对白纹伊蚊细胞色素P450 CYP6N3基因进行原核表达,以获得高效表达蛋白.方法根据CYP6N3基因的全长cRNA为模板进行RT-PCR.产物经T-A克隆测序鉴定后,亚克隆入原核融合表达载体pGEX-4T-1(含有编码26KDa GST的基因序列)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达.将细菌总蛋白进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,通过Western blot分析鉴定目的蛋白的位置,并运用核酸蛋白分析仪扫描凝胶以确定表达产物的含量.结果获得了高效表达的融合蛋白GST-CYP6N3,表达量占菌体总蛋白的37.49%.结论本实验成功地异源表达了白纹伊蚊CYP6N3基因,为体外重建细胞色素P450 CYP6N3单加氧酶系,了解CYP6N3基因结构功能关系奠定基础.

关键词：白纹伊蚊、细胞色素P450、CYP6N3、原核表达

所属期刊栏目：18

分类号：R384.1(医学寄生虫学)

资助基金：广东省自然科学基金970092;国家"211"工程建设项目98124

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：9-12