10.3969/j.issn.1002-2694.2001.05.010
弓形虫RH株ROP1抗原基因的克隆与表达
目的在大肠杆菌中高效表达ROP1抗原.方法采用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫RH株cDNA文库中扩增得到编码ROP1的基因,经DNA序列分析后导入表达载体pGEX-5x-3,然后在大肠杆菌BL21中进行表达,用亲和层析柱纯化表达产物, 并用SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定.结果 (1)在我们比较的1 249 个碱基中,我们得到的ROP1基因在Ossorio报道的基因的447位与448 位之间有一96bp的插入片段,另有14个碱基不同,造成3个氨基酸的改变,两基因之间有91.19%的同源性,(2)得到一分子量约为70kDa的融合蛋白.结论 1,我们获得了一与Ossorio报道的基因有较大差异的rop1基因(GeneBank登录号:AF350261) (2),ROP1基因在大肠杆菌中得到了R OP1融合蛋白的高效表达.
弓形虫、ROP1、PCR、基因表达
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R382.5(医学寄生虫学)
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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