查菲埃立克体120kDa抗原蛋白基因的克隆与表达

摘要：

目的克隆查菲埃立克体120kDa膜表面免疫决定性蛋白基因,并使之在原核表达系统中表达.方法查菲埃立克体分离株(91HE17)感染DH82细胞40天后收集DH82细胞.根据查菲埃立克体P120蛋白基因序列设计特异性引物,套式PCR扩增查菲埃立克体P120蛋白基因部分片段,将PCR扩增产物用BamHⅠ和EcoRⅠ限制性内切酶双酶切后与pUC18载体连接,在获得阳性克隆子后用限制性内切酶将克隆片段切下,定向插入原核表达载体pProEX HTb构建pProEX HTb/P120重组质粒.将重组质粒转化E coli DH5α,并使之在IPTG的诱导下进行蛋白质表达.结果裁短成1080bp的查菲埃立克体P120蛋白基因克隆到pUC18载体,用IPTG诱导pProEX HTb/P120重组质粒转化的E.coli DH5α,表达一分子量大小约为47kDa的融合蛋白.结论查菲埃立克体120kDa抗原蛋白基因能在原核表达系统中表达,为诊断试剂盒的研制及其它研究工作提供了基础.

关键词：查菲埃立克体、膜蛋白抗原、基因克隆、表达

所属期刊栏目：17

分类号：R376(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：13-16