10.3969/j.issn.1002-2694.2001.03.010
肺炎支原体P1蛋白结构基因片段的制备及C末端基因片段克隆的研究
目的制备肺炎支原体P1蛋白结构基因,并在大肠杆菌中克隆肺炎支原体P1蛋白C末端基因片段,为P1蛋白基因片段的扩增、表达及探讨C末端基因片段功能打基础。方法 PCR扩增方法获取P1结构基因。扩增产物用P1蛋白基因特异引物扩增鉴定。用Sal Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶酶切消化方法制备P1蛋白C末端基因片段,并与pUC19 DNA连接,转入大肠杆菌JM109菌株。用X-gal 平板及质粒图谱分析方法筛选重组克隆株,再用限制性核酸内切酶酶切图谱分析鉴定。结果经PCR扩增MP DNA 获得一条5.0 kb DNA片段,用P1基因区特异引物扩增鉴定获得阳性结果。重组质粒限制性内切酶指纹图谱显示出两条带,一条为pUC19 载体 DNA带,另一条是1 kb的插入片段。结论获得肺炎支原体P1蛋白结构基因及含P1蛋白C末端DNA片段的重组克隆株。
肺炎支原体、P1蛋白基因、基因克隆
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R375(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
辽宁省自然科学基金519068
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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