恶性疟原虫海南株STARP基因真核表达重组质粒的构建及基因结构分析

摘要：

目的构建恶性疟原虫海南(FCC1/HN)株STARP基因真核表达重组质粒pcDNA3-STARP；分析STARP基因结构,并了解FCC1/HN株与其它分离株STARP基因序列的差异。方法根据STARP基因已知序列设计合成两对引物,用PCR技术从FCC1/HN株基因组DNA中扩增两个部分序列重叠的STARP基因片段；将两基因片段分别双酶切后定向克隆入真核表达载体pcDNA3，转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。酶切，PCR扩增鉴定筛选重组质粒阳性克隆；用双脱氧链末端终止法测序，应用软件辅助分析基因结构及进行同源性比较。结果分别PCR扩增获得1 078bp，1 092bp的两个STARP基因片段；经双酶切及PCR鉴定表明获得正确重组质粒；恶性疟原虫FCC1/HN株与T9/96株STARP基因核苷酸序列同源性为92.2%；推测编码氨基酸序列同源性为90.9%；在STARP蛋白中部重复区推测有多个明显的抗原表位区段。结论从FCC1/HN株恶性疟原虫基因组DNA中获取STARP基因，并成功构建真核表达重组质粒pcDNA3-STARP；FCC1/HN株与其它分离株STARP基因有高度的同源性。

关键词：恶性疟原虫、子孢子苏氨酸及天冬酰胺富集蛋白、聚合酶链式反应、克隆、基因测序

所属期刊栏目：17

分类号：R382.3(医学寄生虫学)

资助基金：国家"211"工程建设项目98169;广东省自然科学基金980089;高等学校博士学科点专项科研项目博教93-186

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：25-30