乙肝蛋黄抗体的制备和鉴定

摘要：

@@用抗原免疫产蛋鸡，从蛋黄中制备特异抗体，是一种方便、经济的抗体来源，已受到国内外研究者们的关注。大量研究表明蛋黄抗体(YOLK IgGU简称IgY)，性质比较稳定，耐酸、耐热，室温下贮存6个月，4C下保存5年，对免疫学试验产生干扰少，可用于免疫诊断和疾病的防治研究[1～4]。基于上述特点，我们选用乙肝抗原免疫产蛋鸡，从蛋黄中制备特异抗体，并对其抗体进行了初步鉴定，在国内未见报道，本文就乙肝抗体的研制结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 乙肝病毒抗原由湖北省医科院病毒所提供。批号为970925。
1.2 产蛋鸡由武昌县鸡场提供。
1.3 鸡的免疫乙肝抗原配成50μg／ml、25μg／ml两种剂量各与等体积佐剂混合。翅膀下、胸脯肌分点注射。首次免疫，抗原与完全佐剂混合。10天、1个月、抗原与不完全剂混合各再免疫1次。第3次免疫的后第7天开始收蛋，约收7周。
1.4 乙肝蛋黄抗体的制备参照A Kita方法4稍加改进，其步骤是蛋黄、生理盐水1：2混合后，加适量体积氯仿搅拌匀，沉淀再加盐水洗涤1次，将两次上清混合加入饱和硫酸铵沉淀蛋黄抗体，PBS透析，即为粗提乙肝IgY，测蛋白含量备用。
1.5 粗提IgY 过柱 DEAE-葡聚糖A50，经常规处理后，用0.015mol／LTris-HCl pH8.0缓冲液平衡装入2×40cm玻璃柱，上样后用缓冲液进行洗脱。

机标关键词：乙肝抗原、蛋黄抗体、制备和鉴定、egg yolk、抗原免疫、产蛋鸡、特异抗体、缓冲液、免疫学试验、硫酸铵沉淀、完全佐剂、乙肝抗体、性质比较、体积、生理盐水、免疫诊断、国内、防治研究、方法、蛋白含量

所属期刊栏目：16

分类号：R51;R18

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：109-110