汉滩病毒截短核蛋白在大肠杆菌中表达及其抗原分析

摘要：

目的体外克隆表达肾综合征出血热病毒部分核蛋白编码基因,筛选病毒核蛋白在人体体液应答中的主要抗原决定簇区,以期获得高质量核蛋白抗原,为研制新型HFRS基因工程诊断试剂奠定基础.方法利用聚合酶链反应(PCR)和限制性内切酶酶切的方法分离汉滩病毒76-118S片段部分编码基因(SA、SB和SC),并分别克隆入T7原核表达载体,在大肠杆菌中表达;免疫印迹试验和酶联免疫吸附反应分析重组抗原活性.结果截短核蛋白得到有效表达,分子量分别约为4.5KD(rSA)、2 5kD(rSB)和15.5kD(rSC),Western-blot分析表明25kD截短核蛋白具有较好的抗原活性;粗提抗原Dot-ELISA方法检测HFRS患者血清结果与IFA法一致;25kD重组小片段抗原与抗HFRSV单克隆抗体5H5、B11及H7可发生特异性反应.结论汉滩病毒核蛋白的主要抗原决定簇主要集中在氨基端;原核表达的截短核蛋白在HFRSV感染的血清学诊断中具有一定的价值.

关键词：肾综合征出血热病毒、重组核蛋白、免疫印迹试验、间接酶联免疫、吸附试验

所属期刊栏目：15

分类号：R1;S8

资助基金：中国科学院资助项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：67-70